懷疑灰指甲需進行真菌鏡檢、真菌培養、甲板病理檢查、伍德燈檢查及甲下碎屑PCR檢測五項核心檢查。灰指甲醫學稱為甲真菌病，主要由皮膚癬菌、酵母菌或霉菌感染引起。
1、真菌鏡檢：
取病甲碎屑用氫氧化鉀溶液處理后顯微鏡觀察，可直接發現菌絲或孢子，陽性率約60%-70%。該方法快速經濟，但無法區分具體菌種，需結合其他檢查綜合判斷。采樣時需刮取甲板深層病變組織以提高檢出率。
2、真菌培養：
將甲屑接種于沙氏培養基培養2-4周，可明確致病菌種類并指導用藥。皮膚癬菌常見紅色毛癬菌、須癬毛癬菌；非皮膚癬菌包括念珠菌、曲霉菌等。培養陽性率約50%，但特異性高，對頑固病例尤為重要。
3、甲板病理：
通過甲板活檢觀察真菌侵入甲板的深度和模式，適用于鏡檢陰性但臨床高度懷疑者。病理可見甲板內菌絲、甲下角化過度等特征，能鑒別銀屑病甲、扁平苔蘚等類似疾病，需由專業病理醫師判讀。
4、伍德燈檢查：
特定波長紫外線照射病甲，部分真菌代謝產物會呈現熒光。小孢子菌感染可見亮綠色熒光，但多數致病菌無熒光反應，陰性結果不能排除診斷。該檢查主要用于快速篩查，需結合其他檢測手段。
5、PCR檢測：
分子生物學方法檢測甲屑中真菌DNA，靈敏度達90%以上，可識別傳統培養難以分離的菌種。對混合感染、非典型病例有優勢，但成本較高且尚未普及，多用于科研或疑難病例診斷。
確診灰指甲后需保持足部干燥透氣，每日更換棉襪并用60℃以上熱水燙洗。避免與他人共用指甲剪、拖鞋等物品，公共場所建議穿戴防水拖鞋。飲食可適當增加富含鋅、鐵的食物如牡蠣、菠菜，有助于甲板修復。治療期間定期復查肝功能，部分抗真菌藥物可能引起肝酶異常。合并糖尿病等基礎疾病者需優先控制血糖，以改善治療效果。
