兒童青光眼的診斷需結合臨床表現、眼壓測量及眼部結構檢查綜合判斷。兒童青光眼分為原發性先天性青光眼和繼發性青光眼兩類，診斷標準主要依據眼壓異常升高、視神經損害特征及特征性眼部改變。
眼壓測量是診斷的核心指標。正常兒童眼壓范圍為10-21毫米汞柱，若多次測量結果超過21毫米汞柱需警惕。嬰幼兒需在全麻下使用手持式眼壓計測量，學齡兒童可采用非接觸式眼壓計。眼壓晝夜波動大于5毫米汞柱具有診斷意義。
特征性眼部改變包括角膜直徑增大新生兒超過11毫米、角膜水腫混濁、后彈力層破裂形成的Haab紋。眼底檢查可見視杯擴大杯盤比大于0.3，進行性視神經纖維層變薄。前房角鏡檢查顯示房角發育異常是原發性先天性青光眼的典型表現。
輔助檢查包括超聲生物顯微鏡評估房角結構，光學相干斷層掃描監測視神經纖維層厚度變化。視野檢查適用于能配合的學齡兒童，早期可發現旁中心暗點。基因檢測對某些綜合征相關青光眼有確診價值。
診斷需排除角膜混濁的其他病因如先天性角膜營養不良，鑒別繼發性青光眼的原發病因如葡萄膜炎、眼外傷等。對于可疑病例建議轉診至兒童眼科專科中心，通過多模態影像檢查實現早期診斷。
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