冷凍的母乳可以通過溫水浸泡或冷藏室緩慢解凍，禁止使用微波爐或沸水加熱。解凍后的母乳需在24小時內使用完畢，不可重復冷凍。
冷凍母乳解凍時建議將儲奶袋放入40℃以下的溫水中浸泡，期間可輕輕搖晃幫助均勻受熱。冷藏解凍需提前12小時將母乳移至4℃冷藏室，這種方法能最大限度保留營養成分。解凍后若出現分層現象屬正常，輕輕搖勻即可。母乳中的活性物質如免疫球蛋白對溫度敏感，高溫會破壞其結構。
特殊情況下如需快速解凍，可將密封的儲奶袋置于流動冷水下沖洗，但水溫不應超過37℃。早產兒或免疫力低下嬰兒的母乳需更嚴格控制解凍溫度。解凍后若發現酸敗味、變色或結塊應丟棄。母乳脂肪在冷凍后可能發生氧化，產生金屬味但通常不影響安全性。
儲存母乳時應標注擠奶日期，按先進先出原則使用。解凍后的母乳可置于溫奶器保溫2小時，喂養前滴在手腕內側測試溫度。哺乳期媽媽需保持均衡飲食，適量增加優質蛋白和水分攝入，避免食用可能引起嬰兒過敏的食物。定期清潔吸奶器和儲奶容器，避免細菌污染。
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